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Anwendung von Live Cell Imaging und Cryo-Electron Tomography zur Auflösung der raumzeitlichen Merkmale des Legionella pneumophila Dot/Icm Sekretionssystems
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Journal JoVE Immunologie et infection
Applying Live Cell Imaging and Cryo-Electron Tomography to Resolve Spatiotemporal Features of the Legionella pneumophila Dot/Icm Secretion System
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Anwendung von Live Cell Imaging und Cryo-Electron Tomography zur Auflösung der raumzeitlichen Merkmale des Legionella pneumophila Dot/Icm Sekretionssystems

DOI:
10.3791/60693-v

•

09:12 min

•

March 10, 2020

•

, , , ,
1Department of Microbial Pathogenesis, Boyer Center for Molecular Medicine,Yale University School of Medicine, 2Microbial Sciences Institute,Yale University, 3Department of Microbiology and Molecular Genetics, McGovern Medical School,The University of Texas Health Science Center at Houston

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:55Live Cell Imaging of L. pneumophila with Fluorescently Tagged Dot/Icm Components
  • 02:47Quantification of Polar Localization and Dynamics of Dot/Icm Components
  • 05:36Detection of sfGFP Mass Density with Cryo-ET
  • 06:23Results: Imaging Dot/Icm Secretion Systems in Intact Bacteria
  • 08:17Conclusion

Summary

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Die Bildgebung von Bakterienzellen ist ein aufkommendem systembiologischen Ansatz, der sich auf die Definition statischer und dynamischer Prozesse konzentriert, die die Funktion großer makromolekularer Maschinen diktieren. Hier wird die Integration von quantitativer Live-Zell-Bildgebung und Kryo-Elektronentomographie verwendet, um Legionella pneumophila Typ IV Sekretionssystemarchitektur und -funktionen zu untersuchen.

Tags

Live Cell ImagingCryo-electron TomographyLegionella PneumophilaDot/Icm Secretion SystemBacterial Secretion ComplexesHost-pathogen InteractionsStructural-functional RelationshipsAgarose PadsFluorescence MicroscopyPolarity Quantification

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