Journal
/
Biochimie
/
Oprettelse af meget specifikke kemisk induceret protein Dimerization systemer ved trinvis Phage udvælgelse af en kombinatorisk enkelt domæne antistof bibliotek
Journal JoVE
Biochimie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Biochimie
Creating Highly Specific Chemically Induced Protein Dimerization Systems by Stepwise Phage Selection of a Combinatorial Single-Domain Antibody Library

Oprettelse af meget specifikke kemisk induceret protein Dimerization systemer ved trinvis Phage udvælgelse af en kombinatorisk enkelt domæne antistof bibliotek

DOI:
10.3791/60738-v

•

10:17 min

•

January 14, 2020

•

, , , ,
1Department of Biochemistry and Institute for Protein Design,University of Washington

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:47TG1 Cell and Negative Selection Bead Preparation
  • 02:15Positive Selection Bead Preparation
  • 03:33Phage-displayed Nanobody Elution and Input/Output Titrations and Infection
  • 05:15Single Clone Isolation
  • 06:22Anchor Binder Validation
  • 08:13Results: Representative Anchor and Dimerization Binder Characterization
  • 09:39Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Oprettelse af kemisk induceret protein denne systemer med ønsket affinitet og specificitet for en given lille molekyle ligand ville have mange biologiske sensing og aktuering applikationer. Her beskriver vi en effektiv, generaliserbar metode til de Novo engineering af kemisk inducerede denne systemer via det trinvise valg af et Phage-vist kombinatorisk enkelt domæne antistof bibliotek.

Tags

Keywords: Protein DimerizationBiosensorPhage DisplaySingle-domain AntibodySmall MoleculeCell BehaviorCell Metabolite MonitoringStreptavidin BeadsBiotinylated LigandNegative And Positive Selection

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/60738?article_type=v

Bakteriel Inner-membran Display til screening af et bibliotek af antistof fragmenter
check_url/fr/60738?article_type=v

Effektiv og site-specifikt antistof Mærkning af stamme-forfremmet azid-alkyn Cycloaddition
check_url/fr/60738?article_type=v

Måling af proteinbinding til F-actin ved co-sedimentering
check_url/fr/60738?article_type=v

Påvisning og visualisering af DNA-skader-inducerede proteinkomplekser i suspensionscellekulturer ved anvendelse af Proximity Ligation Assay
check_url/fr/60738?article_type=v

Protein Film infrarød elektrokemi demonstrerede for undersøgelse af H2 Oxidation af en [NiFe] Hydrogenase
check_url/fr/60738?article_type=v

Meget følsom og kvantitativ påvisning af proteiner og deres isoformer af kapillar isoelektrisk fokusering metode
check_url/fr/60738?article_type=v

Indfange interaktion kinetik af en Ion-kanal Protein med små molekyler af Bio-lag interferometri Assay
check_url/fr/60738?article_type=v

Immunisering af Alpaka (Lama pacos) med Protein antigener og produktion af Antigen-specifikke enkelt domæne antistoffer
check_url/fr/60738?article_type=v

Høj følsomhed måling af transskription faktor-DNA bindende tilhørsforhold ved konkurrencedygtige titrering med Fluorescens mikroskopi
check_url/fr/60738?article_type=v

Analyse af proteinfoldning, Transport og nedbrydning i levende celler af radioaktivt puls Chase

Read Article