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定量化とサイトローカリゼーションのための2つの翻訳後修飾の同時アフィニティエンリッチメント
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Simultaneous Affinity Enrichment of Two Post-Translational Modifications for Quantification and Site Localization
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定量化とサイトローカリゼーションのための2つの翻訳後修飾の同時アフィニティエンリッチメント

DOI:
10.3791/60780-v

•

12:11 min

•

February 27, 2020

•

, , , , ,
1Buck Institute for Research on Aging

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:19Desalting of Non-Enriched Proteolytic Peptides via Large-Scale Solid-Phase Extraction
  • 02:46Simultaneous Enrichment of K-acetylated and K-succinylated Peptides with Immunoaffinity Beads
  • 04:30Elution of the Peptides Bound to Antibody Beads
  • 07:02Data Acquisition Using DDA (Data-Dependent Acquisition) and DIA (Data-Independent Acquisition)
  • 10:02Results: One-pot Enrichment of PTMs
  • 11:19Conclusion

Summary

Traduction automatique

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このワークフローは、定量的なグローバルプロテオーム分析のために、複数のタンパク質翻訳後修飾(PTM)を同時に時間効率とコスト効率の高い濃縮のパフォーマンスを説明します。このプロトコルは、ペプチドレベルPTM濃縮を複数の結合抗体で利用し、続いてデータ非依存の獲得質量分析を行い、PTMクロストークに関する生物学的洞察を得る。

Tags

Keywords: Simultaneous Affinity EnrichmentPost-translational ModificationsQuantificationSite LocalizationMass SpectrometryAcetylationSuccinylationProtein ModificationsPTMsReproducibilityC18 ResinImmunoaffinity Purification

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