Journal
/
Biologie
/
Samtidig affinitetberikelse av to post-translational modifikasjoner for kvantifisering og lokalisering av nettstedet
Journal JoVE
Biologie
This content is Free Access.
Journal JoVE Biologie
Simultaneous Affinity Enrichment of Two Post-Translational Modifications for Quantification and Site Localization

Samtidig affinitetberikelse av to post-translational modifikasjoner for kvantifisering og lokalisering av nettstedet

DOI:
10.3791/60780-v

•

12:11 min

•

February 27, 2020

•

, , , , ,
1Buck Institute for Research on Aging

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:19Desalting of Non-Enriched Proteolytic Peptides via Large-Scale Solid-Phase Extraction
  • 02:46Simultaneous Enrichment of K-acetylated and K-succinylated Peptides with Immunoaffinity Beads
  • 04:30Elution of the Peptides Bound to Antibody Beads
  • 07:02Data Acquisition Using DDA (Data-Dependent Acquisition) and DIA (Data-Independent Acquisition)
  • 10:02Results: One-pot Enrichment of PTMs
  • 11:19Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Denne arbeidsflyten beskriver ytelsen til tids- og kostnadseffektiv berikelse av flere proteinpost-translational modifikasjoner (PTMs) samtidig for kvantitativ global proteomisk analyse. Protokollen benytter ptm berikelse på peptidnivå med flere konjugerte antistoffer, etterfulgt av datauavhengig oppkjøpsmassespektrometrianalyse for å få biologisk innsikt i PTM crosstalk.

Tags

Keywords: Simultaneous Affinity EnrichmentPost-translational ModificationsQuantificationSite LocalizationMass SpectrometryAcetylationSuccinylationProtein ModificationsPTMsReproducibilityC18 ResinImmunoaffinity Purification

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/60780?article_type=v

Principles of Site-Specific Recombinase (SSR) Technology
check_url/fr/60780?article_type=v

Detection of Post-translational Modifications on Native Intact Nucleosomes by ELISA
check_url/fr/60780?article_type=v

Quantification of Proteins Using Peptide Immunoaffinity Enrichment Coupled with Mass Spectrometry
check_url/fr/60780?article_type=v

GST-Hans rensing: en to-trinns Affinitetsrensing Protocol Givende Full-lengde Purified Proteiner
check_url/fr/60780?article_type=v

Simultaneous Multicolor Imaging of Biological Structures with Fluorescence Photoactivation Localization Microscopy
check_url/fr/60780?article_type=v

Spirende Gjær Protein Extraction og rensing for studier av funksjon, interaksjoner, og posttranslasjonelle modifikasjoner
check_url/fr/60780?article_type=v

Identifisering av Post-translasjonell Modifikasjoner av Plant Protein komplekser
check_url/fr/60780?article_type=v

High Resolution Kvantifisering av krystallinsk cellulose akkumulering i<em> Arabidopsis</em> Roots å overvåke Tissue-spesifikke Cell Wall Modifikasjoner
check_url/fr/60780?article_type=v

Komplett arbeidsflyt for analyse av Histone posttranslasjonelle modifikasjoner hjelp Bottom-up massespektrometri: Fra Histone Utvinning til dataanalyse
check_url/fr/60780?article_type=v

Kvantifisering av områdespesifikke Protein lysin Acetylation og Succinylation støkiometri ved hjelp av Data-uavhengig oppkjøpet massespektrometri

Read Article