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Combined Conditional Knockdown and Adapted Sphere Formation Assay to Study a Stemness-Associated Gene of Patient-derived Gastric Cancer Stem Cells
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Derribo condicional combinado y ensayo de formación de esferas adaptadas para estudiar un gen asociado a la stemness de células madre de cáncer gástrico derivadas del paciente

DOI:
10.3791/60799-v

•

09:24 min

•

May 09, 2020

•

, , ,
1Guangdong Key Laboratory of Genome Stability and Human Disease Prevention, Department of Pharmacology and Shenzhen University International Cancer Center,Shenzhen University School of Medicine

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:02Generation of Inducible Knockdown GCSCs Lines
  • 03:31Generation of Stable Transfected Cell Lines
  • 06:12Sphere Formation Assay
  • 06:54Results: Inducible Knockdown of Clusterin Inhibits GCSC Self-renewal Capacity
  • 08:22Conclusion

Summary

Traduction automatique

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En este protocolo, presentamos un diseño experimental utilizando un sistema de derribo condicional y un ensayo de formación de esferas adaptadas para estudiar el efecto de clusterin en el tallo de los GCSC derivados del paciente. El protocolo se puede adaptar fácilmente para estudiar la función in vitro e in vivo de genes asociados a la stemness en diferentes tipos de CSC.

Tags

Keywords: Cancer Stem CellsConditional KnockdownSphere Formation AssayStemness-associated GenesGastric CancerLentivirus293T CellsTransfectionVirus Concentration

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