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Geração escalável de organoides cerebelares maduros de células-tronco pluripotentes humanas e caracterização por imunostaining
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Journal JoVE Bio-ingénierie
Scalable Generation of Mature Cerebellar Organoids from Human Pluripotent Stem Cells and Characterization by Immunostaining

Geração escalável de organoides cerebelares maduros de células-tronco pluripotentes humanas e caracterização por imunostaining

DOI:
10.3791/61143-v

•

10:40 min

•

June 13, 2020

•

, , , , , , , , ,
1iBB – Institute for Bioengineering and Biosciences and Department of Bioengineering, Instituto Superior Técnico,Universidade de Lisboa, 2Instituto de Medicina Molecular João Lobo Antunes, Faculdade de Medicina,Universidade de Lisboa, 3The Discoveries Centre for Regenerative and Precision Medicine, Lisbon Campus,Universidade de Lisboa, 4PBS Biotech, Inc, Camarillo, CA, USA

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:23Seeding the Bioreactor
  • 02:06Differentiation and Maturation of Aggregates
  • 03:26Preparing Organoids for Cryosectioning
  • 05:47Immunostaining
  • 08:27Results: Efficient Cerebellar Differentiation and Maturation
  • 10:09Conclusion

Summary

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Este protocolo descreve um sistema de cultura dinâmica para produzir agregados de tamanho controlado de células-tronco pluripotentes humanas e estimular ainda mais a diferenciação em organoides cerebelares sob condições quimicamente definidas e livres de alimentadores usando um bioreator de uso único.

Tags

Keywords: Cerebellar OrganoidsHuman Pluripotent Stem CellsScalable GenerationSingle-use BioreactorsImmunostainingIPSC AggregatesGfCDM Differentiation MediumCell DetachmentCentrifugationCell CountingBioreactor CultivationMedium ExchangeOrganoid Storage

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