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X-Ray krystallografi at studere oligomeric stat Overgang af Thermotoga maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050
Journal JoVE
Biochimie
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Journal JoVE Biochimie
X-Ray Crystallography to Study the Oligomeric State Transition of the Thermotoga maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050
DOI:

11:27 min

May 13, 2020

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Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:03Activity Assay
  • 02:19Apoenzyme Preparation
  • 03:32Dimer Preparation
  • 04:03Microseeding
  • 05:01X-Ray Diffraction
  • 05:48Indexation
  • 06:50Molecular Replacement
  • 08:04Model Building
  • 09:07Results: Representative Thermotoga Maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050 Oligomeric State Transition
  • 10:50Conclusion

Summary

Traduction automatique

Denne protokol er udviklet til at studere dimer-dodecamer overgang af TmPep1050, en M42 aminopeptidase, på det strukturelle niveau. Det er en enkel rørledning, der starter fra proteinrensning til røntgendatabehandling. Crystallogenesis, datasæt indeksering, og molekylær udskiftning er blevet understreget gennem et studie, TmPep1050H60A H307A variant.

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