Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:04Introduction
- 01:03Activity Assay
- 02:19Apoenzyme Preparation
- 03:32Dimer Preparation
- 04:03Microseeding
- 05:01X-Ray Diffraction
- 05:48Indexation
- 06:50Molecular Replacement
- 08:04Model Building
- 09:07Results: Representative Thermotoga Maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050 Oligomeric State Transition
- 10:50Conclusion
Dit protocol is ontwikkeld om de dimer-dodecamer overgang van TmPep1050, een M42 aminopeptidase, op structureel niveau te bestuderen. Het is een eenvoudige pijplijn vanaf eiwitzuivering tot röntgengegevensverwerking. Crystallogenesis, data set indexatie, en moleculaire vervanging zijn benadrukt door middel van een geval van studie, TmPep1050H60A H307A variant.
