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FLIM-FRET Messungen von Protein-Protein-Wechselwirkungen in lebenden Bakterien.
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FLIM-FRET Measurements of Protein-Protein Interactions in Live Bacteria.
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FLIM-FRET Messungen von Protein-Protein-Wechselwirkungen in lebenden Bakterien.

DOI:
10.3791/61602-v

•

09:26 min

•

August 25, 2020

•

, , , , , , , , ,
1Université de Strasbourg,Laboratoire de Bioimagerie et Pathologies, UMR CNRS 7021, 2Université de Strasbourg, UMR 7242, ESBS, 3CNRS, UMR 7242, ESBS, 4Groupe Méthode Recherche Clinique,Hôpitaux Universitaires de Strasbourg

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:41Fluorescent Tag Insertion into the Chromosomal Genome of P. aeruginosa
  • 03:02Preparation of Agarose Pad
  • 03:57Imaging with a Two-photon Microscopy Setup
  • 06:44Results: FLIM-FRET Data Visualization and Analysis
  • 08:57Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Wir beschreiben hier ein Protokoll zur Charakterisierung von Protein-Protein-Wechselwirkungen zwischen zwei stark unterschiedlich exprimierenden Proteinen in lebenden Pseudomonas aeruginosa mit FLIM-FRET-Messungen. Das Protokoll umfasst Bakterienstammkonstruktionen, Bakterienimmobilisierung, Bildgebung und Nach-Imaging-Datenanalyseroutinen.

Tags

FLIM-FRETProtein-protein InteractionsLive BacteriaLive CellsP.aeruginosaE.coliFluorescent ProteinsMicroscopyAgaroseGentamycin

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