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Chapitres
- 00:04Introduction
- 00:36Donor/Acceptor Förster Resonance Energy Transfer (FRET) Pair Selection
- 01:13Cell Synchronization
- 01:42FRET/Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy (FLIM) Acquisitions
- 02:50Donor/Acceptor Pair Delta Lifetime Calculation and FLIM Value Comparison
- 03:53Results: Representative Aurora Kinase A (AURKA) FRET Biosensor and Negative Control Images
- 05:52Conclusion
Die Aktivierung der multifunktionalen Ser/Thr-Kinase AURKA zeichnet sich durch ihre Autophosphorylierung auf Thr288 aus. Fluoreszierende Sonden, die auf FRET setzen, können zwischen inaktivem und aktiviertem Zustand unterscheiden. Hier veranschaulichen wir einige Strategien für das Sonden-Engineering, zusammen mit einem schnellen FRET-Protokoll, um die Kinase-Aktivierung während der mitose zu verfolgen.
