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Derivação, Expansão, Criopreservação e Caracterização de Células Endoteliais Microvasculares Cerebrais de Células-Tronco Pluripotentes Induzidas Humanas
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Derivation, Expansion, Cryopreservation and Characterization of Brain Microvascular Endothelial Cells from Human Induced Pluripotent Stem Cells

Derivação, Expansão, Criopreservação e Caracterização de Células Endoteliais Microvasculares Cerebrais de Células-Tronco Pluripotentes Induzidas Humanas

DOI:
10.3791/61629-v

•

08:04 min

•

November 19, 2020

•

, ,
1Center for Genomic Medicine,Massachusetts General Hospital, 2Department of Psychiatry,Beth Israel Deaconess Medical Center, 3Chemical Biology and Therapeutic Science Program,Broad Institute of MIT and Harvard, 4Department of Psychiatry,Harvard Medical School, 5Schizophrenia and Bipolar Disorder Program,McLean Hospital

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:38Brain Microvascular Endothelial Cell (BMEC) Differentiation from Human Induced Pluripotent Stem Cell (iPSC)
  • 01:46iPSC-Derived BMEC Subculture and Purification
  • 03:02Trans-Endothelial Electrical Resistance (TEER) Measurement and Analysis
  • 04:09Efflux Transporter Activity and Analysis
  • 05:22Results: Representative BMEC Differentiation and Characterization After Passaging, Subculture, and Cryopreservation
  • 07:18Conclusion

Summary

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Este protocolo detalha um método adaptado para derivar, expandir e criopreservar células microvasculares microvasculares cerebrais obtidas pela diferenciação de células-tronco pluripotentes induzidas pelo homem, e para estudar as propriedades da barreira cerebral no sangue em um modelo ex vivo.

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Keywords: Brain Microvascular Endothelial CellsHuman Induced Pluripotent Stem CellsBlood-brain BarrierBMEC DerivationBMEC ExpansionBMEC CryopreservationBMEC CharacterizationTEER AnalysisEfflux Transporter ActivityDisease Modeling

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