Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:05Introduction
- 00:51Equipment Preparation
- 03:113’-End Biotinylated mRNA Immobilization
- 05:20Translation Mix Assembly and Delivery
- 07:24Results: Analyses for Saccharomyces cerevisiae Translation of a Firefly Luciferase-encoding mRNA
- 09:12Conclusion
Отслеживание отдельных событий перевода позволяет проводить кинетические исследования механизмов перевода с высоким разрешением. Здесь мы демонстрируем одномекулярный анализ in vitro, основанный на взаимодействии изображений между флуоресцентно помеченными антителами и эпитопными зарождающимися пептидами. Этот метод позволяет одномекулярной характеристики инициации и пептидной кинетики удлинения во время активного в пробирке крышка-зависимый перевод.
