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Messung von 3-dimensionalen cAMP-Verteilungen in lebenden Zellen mittels 4-dimensionaler (x, y, z und λ) hyperspektraler FRET-Bildgebung und -Analyse
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Journal JoVE Biologie
Measurement of 3-Dimensional cAMP Distributions in Living Cells using 4-Dimensional (x, y, z, and λ) Hyperspectral FRET Imaging and Analysis
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Messung von 3-dimensionalen cAMP-Verteilungen in lebenden Zellen mittels 4-dimensionaler (x, y, z und λ) hyperspektraler FRET-Bildgebung und -Analyse

DOI:
10.3791/61720-v

•

08:22 min

•

October 27, 2020

•

, , , , , ,
1Department of Pharmacology,University of South Alabama, 2Center for Lung Biology,University of South Alabama, 3Department of Chemical and Biomolecular Engineering,University of South Alabama

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:34Imaging Preparation
  • 01:16Image Acquisition
  • 04:00Image Analysis
  • 05:22FRET Efficiency Calculation and Mapping
  • 06:26Results: Representative 3D cAMP Distribution and Hyperspectral FRET Imaging and Analysis
  • 07:57Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Aufgrund des inhärenten niedrigen Signal-Rausch-Verhältnisses (SNR) von Fӧrster-Resonanz-Energieübertragungssensoren (FRET) war die Messung von cAMP-Signalen eine Herausforderung, insbesondere in drei räumlichen Dimensionen. Hier beschreiben wir eine hyperspektrale FRET-Bildgebungs- und Analysemethodik, die die Messung der cAMP-Verteilung in drei räumlichen Dimensionen ermöglicht.

Tags

Keywords: 3D CAMP Distribution4D Hyperspectral FRET ImagingCyclic AMPFRETConfocal MicroscopySpectral Imaging3D Cell ImagingLive Cell ImagingTyrodes BufferNuclear LabelingLaser SettingsZ-stack Acquisition

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