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Medición de distribuciones de cAMP tridimensionales en células vivas utilizando imágenes y análisis FRET hiperespectrales de 4 dimensiones (x, y, z y λ)
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Journal JoVE Biologie
Measurement of 3-Dimensional cAMP Distributions in Living Cells using 4-Dimensional (x, y, z, and λ) Hyperspectral FRET Imaging and Analysis
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Medición de distribuciones de cAMP tridimensionales en células vivas utilizando imágenes y análisis FRET hiperespectrales de 4 dimensiones (x, y, z y λ)

DOI:
10.3791/61720-v

•

08:22 min

•

October 27, 2020

•

, , , , , ,
1Department of Pharmacology,University of South Alabama, 2Center for Lung Biology,University of South Alabama, 3Department of Chemical and Biomolecular Engineering,University of South Alabama

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:34Imaging Preparation
  • 01:16Image Acquisition
  • 04:00Image Analysis
  • 05:22FRET Efficiency Calculation and Mapping
  • 06:26Results: Representative 3D cAMP Distribution and Hyperspectral FRET Imaging and Analysis
  • 07:57Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Debido a la baja relación señal-ruido (SNR) inherente de los sensores basados en transferencia de energía de resonancia Fӧrster (FRET), la medición de señales cAMP ha sido un desafío, especialmente en tres dimensiones espaciales. Aquí, describimos una metodología de imagen y análisis FRET hiperespectral que permite la medición de la distribución de cAMP en tres dimensiones espaciales.

Tags

Keywords: 3D CAMP Distribution4D Hyperspectral FRET ImagingCyclic AMPFRETConfocal MicroscopySpectral Imaging3D Cell ImagingLive Cell ImagingTyrodes BufferNuclear LabelingLaser SettingsZ-stack Acquisition

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