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Remoção e Substituição de Ligantes Endógenos de Proteínas e Alérgenos Lipid-Bound
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Removal and Replacement of Endogenous Ligands from Lipid-Bound Proteins and Allergens

Remoção e Substituição de Ligantes Endógenos de Proteínas e Alérgenos Lipid-Bound

DOI:
10.3791/61780-v

•

09:09 min

•

February 24, 2021

•

, ,
1Nuclear Magnetic Resonance Group,National Institute of Environmental Health Sciences

Chapitres

  • 00:04Introduciton
  • 01:13Endogenous Lipid Removal
  • 02:42Reconstitution of Apo- and Cargo-loaded Bla g 1
  • 05:07Phospholipid Cargo Removal/Loading Confirmation
  • 06:22Results: Representative Bla g 1 Purification, Lipid Removal Verification, and Recovery
  • 08:18Conclusion

Summary

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Este protocolo descreve a remoção de lipídios endógenos de alérgenos, e sua substituição por ligantes especificados pelo usuário através de HPLC de fase inversa, juntamente com ressarcimento térmico. 31 P-NMR e dicromaísmo circular permitem a confirmação rápida da remoção/carregamento de ligantes e a recuperação da estrutura de alergênicos nativos.

Tags

Endogenous LigandsLipid-bound ProteinsAllergensReverse-phase HPLCThermal AnnealingSolubilizationBla G 1De-lipidationLyophilizationProtein Yield

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