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Imágenes de fluorescencia multiplexada de una sola célula para visualizar ácidos nucleicos y proteínas virales y monitorear el VIH, el HTLV, el VHB, el VHC, el virus del Zika y la infección por influenza
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Journal JoVE Biologie
Single-Cell Multiplexed Fluorescence Imaging to Visualize Viral Nucleic Acids and Proteins and Monitor HIV, HTLV, HBV, HCV, Zika Virus, and Influenza Infection
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Imágenes de fluorescencia multiplexada de una sola célula para visualizar ácidos nucleicos y proteínas virales y monitorear el VIH, el HTLV, el VHB, el VHC, el virus del Zika y la infección por influenza

DOI:
10.3791/61843-v

•

07:24 min

•

October 29, 2020

•

, , , , ,
1Laboratory of Biochemical Pharmacology, Department of Pediatrics,Emory University School of Medicine, 2Department of Molecular Microbiology & Immunology,University of Missouri School of Medicine

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:24Cell Seeding, Fixation and Permeabilization
  • 01:40Coverslip Immobilization and Protease Treatment
  • 02:31Target Probe and Amplifier Hybridization
  • 03:40Protein Immunostaining and Nuclear Counterstaining
  • 04:48Mounting
  • 05:28Results: Representative Single‐Cell Multiplexed Fluorescence Imaging
  • 06:54Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Aquí se presenta un protocolo para un enfoque de imágenes de fluorescencia, multiplex immunofluorescent cell-based detection of DNA, RNA y protein (MICDDRP), un método capaz de la visualización simultánea de fluorescencia unicelular de proteínas virales y ácidos nucleicos de diferente tipo y varamiento. Este enfoque se puede aplicar a una amplia gama de sistemas.

Tags

Keywords: Single-cellMultiplexedFluorescenceImagingViralNucleic AcidsProteinsHIVHTLVHBVHCVZikaInfluenzaImmunofluorescenceCell-based DetectionDNARNAProteinPoly-D-lysinePermeabilizationProteaseHybridizationMicroscopy

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