Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:05Introduction
- 00:45S30 Ribosomal Protein Lysate Preparation
- 02:17Membrane Scaffold Protein 1E3D1 (MSP1E3D1) Nanodisc Assembly
- 03:243-mL Continuous Exchange Cell-Free (CECF) Reaction Setup
- 04:1060-Microliter CECF Reaction Setup
- 06:07Results: Representative Preformed Nanodisc-Modified Membrane Protein Characterization
- 07:40Conclusion
Önceden oluşturulmuş nanodisklere birlikte translasyonel yerleştirme, tanımlanmış lipit ortamlarında deterjanlarla temas etmeden hücresiz sentezlenmiş membran proteinlerinin incelenmesini mümkün kılar. Bu protokol, temel sistem bileşenlerinin hazırlanmasını ve ifade verimliliğini ve numune kalitesini artırmak için kritik parametreleri açıklar.
