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Produzione cell-free di proteoliposomi per l'analisi funzionale e lo sviluppo di anticorpi mirati alle proteine di membrana
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Cell-Free Production of Proteoliposomes for Functional Analysis and Antibody Development Targeting Membrane Proteins
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Produzione cell-free di proteoliposomi per l'analisi funzionale e lo sviluppo di anticorpi mirati alle proteine di membrana

DOI:
10.3791/61871-v

•

08:46 min

•

September 22, 2020

•

,
1Graduate School of Medicine,Ehime University, 2Proteo-Science Center,Ehime University

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:38In Vitro Transcription
  • 01:12Translation Material Preparation
  • 01:54Liposome Preparation
  • 03:07In Vitro Translation
  • 05:14Proteoliposome Purification
  • 05:56Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE) and Coomassie Brilliant Blue (CBB) Staining
  • 06:57Results: Representative Proteoliposome Production by Bilayer-Dialysis
  • 08:01Conclusion

Summary

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Questo protocollo descrive un metodo efficiente privo di cellule per la produzione di proteoliosomi di alta qualità mediante metodo di dialisi a doppio strato utilizzando un sistema privo di cellule di grano e liposomi. Questo metodo fornisce mezzi adeguati per l'analisi funzionale delle proteine di membrana, lo screening dei bersagli farmacologici e lo sviluppo di anticorpi.

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Keywords: Cell-free ProductionProteoliposomesMembrane ProteinsDrug DiscoveryIn-vitro Protein SynthesisLiposome PreparationWheat Germ ExtractTranscriptionTranslationCell-free Expression

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