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1Department of Ophthalmology,University Hospital RWTH Aachen, 2Experimental Ophthalmology,University of Geneva, 3Department of Ophthalmology,University Hospitals of Geneva, 4Université de Paris, CNRS, INSERM, UTCBS, Unité des technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé, 5Chimie ParisTech,PSL Research University, 6Max Delbrück Center for Molecular Medicine in the Helmholtz Association, 7Division of Medical Biotechnology,Paul-Ehrlich-Institute
Chapitres
- 00:05Introduction
- 00:57Primary Human RPE Cell Electroporation and Plasmid DNA Preparation
- 01:57Cultivated Primary Human RPE Cell Preparation
- 03:19His-Tagged Pigment Epithelium-Derived Factor (PEDF) Fusion Protein Purification
- 04:57Results: Representative Primary Human RPE Transfection and Genetic Modification Evaluation
- 06:24Conclusion
हमने स्लीपिंग ब्यूटी (एसबी) ट्रांसपोसन सिस्टम का उपयोग करके जीन एन्कोडिंग पिगमेंट एपिथेलियम-व्युत्पन्न कारक (पीईडीएफ) के साथ इलेक्ट्रोपोरेशन द्वारा प्राथमिक मानव वर्णक उपकला कोशिकाओं को स्थानांतरित करने के लिए एक प्रोटोकॉल विकसित किया है। सफल अभिकर्मक मात्रात्मक पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (क्यूपीसीआर), इम्यूनोब्लोटिंग और एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख (एलिसा) द्वारा प्रदर्शित किया गया था।
