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眠れる森の美女トランスポゾンシステムを用いた初代ヒト色素上皮細胞のエレクトロポレーションに基づく遺伝子改変
Journal JoVE
Médecine
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Journal JoVE Médecine
Electroporation-Based Genetic Modification of Primary Human Pigment Epithelial Cells Using the Sleeping Beauty Transposon System
DOI:

07:04 min

February 04, 2021

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Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 00:57Primary Human RPE Cell Electroporation and Plasmid DNA Preparation
  • 01:57Cultivated Primary Human RPE Cell Preparation
  • 03:19His-Tagged Pigment Epithelium-Derived Factor (PEDF) Fusion Protein Purification
  • 04:57Results: Representative Primary Human RPE Transfection and Genetic Modification Evaluation
  • 06:24Conclusion

Summary

Traduction automatique

私たちは、 眠れる森の美女 (SB)トランスポゾンシステムを用いて色素上皮由来因子(PEDF)をコードする遺伝子をエレクトロポレーションすることにより、初代ヒト色素上皮細胞をトランスフェクトするプロトコルを開発しました。トランスフェクションの成功は、定量的ポリメラーゼ連鎖反応(qPCR)、イムノブロッティング、および酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)によって実証されました。

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