CRISPR/Cas9 Editing of the C. elegans rbm-3.2 Gene using the dpy-10 Co-CRISPR Screening Marker and Assembled Ribonucleoprotein Complexes.

Amy Smith; Mary Bergwell; Ellie Smith; Danita Mathew; Jyoti Iyer

doi:10.3791/62001

/

CRISPR/Cas9 Redigering af C. elegans rbm-3.2 Genet ved hjælp af dpy-10 Co-CRISPR Screening Marker og Samlet Ribonucleoprotein Complexes.

Journal JoVE
Génétique

This content is Free Access.

Journal JoVE Génétique

CRISPR/Cas9 Editing of the C. elegans rbm-3.2 Gene using the dpy-10 Co-CRISPR Screening Marker and Assembled Ribonucleoprotein Complexes.

CRISPR/Cas9 Redigering af C. elegans rbm-3.2 Genet ved hjælp af dpy-10 Co-CRISPR Screening Marker og Samlet Ribonucleoprotein Complexes.

DOI:

10.3791/62001-v

•

07:46 min

•

December 11, 2020

•

Amy Smith, Mary Bergwell*¹, Ellie Smith*¹, Danita Mathew*¹, Jyoti Iyer

¹Department of Chemistry and Biochemistry,The University of Tulsa

Chapitres

00:04Introduction
00:53C. elegans Gonad Preparation and Microinjection
01:56Injected Worm Recovery and Transfer
02:37PickingC. elegans for Screening
03:17Single Worm Lysis and PCR
04:22Restriction Digestion and Agarose Gel Electrophoresis
05:08Identification of Positively Edited and Homozygous Edited Worms
06:01Results: Representative C. elegans rbm-3.2 Gene Editing and Screening
07:10Conclusion

Summary

Traduction automatique

Målet med denne protokol er at muliggøre problemfri CRISPR /Cas9 redigering af C. elegans genom ved hjælp af samlede ribonucleoprotein komplekser og dpy-10 co-CRISPR markør til screening. Denne protokol kan bruges til at foretage en række genetiske modifikationer i C. elegans herunder indsættelser, sletninger, generstatninger og codon substitutioner.

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

QTL Mapping og CRISPR / Cas9 redigering for at identificere et lægemiddelresistensgen i Toxoplasma gondii</em

Udvælgelsesafhængig og uafhængig generering af CRISPR / Cas9-medierede Gene Knockouts i Pattedyrceller

En standardmetode til at undersøge ejendommen mutagenicitet som en funktion af punkt Mutation reparation katalyseret af CRISPR/Cas9 og SsODN i humane celler

CRISPR/Cas9 Redigering af C. elegans rbm-3.2 Genet ved hjælp af dpy-10 Co-CRISPR Screening Marker og Samlet Ribonucleoprotein Complexes.

•

•

•

Chapitres

Summary

Traduction automatique

Tags

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

QTL Mapping og CRISPR / Cas9 redigering for at identificere et lægemiddelresistensgen i<em> Toxoplasma gondii</em

Udvælgelsesafhængig og uafhængig generering af CRISPR / Cas9-medierede Gene Knockouts i Pattedyrceller

En standardmetode til at undersøge ejendommen mutagenicitet som en funktion af punkt Mutation reparation katalyseret af CRISPR/Cas9 og SsODN i humane celler

Mikroinjektion af CRISPR/Cas9 Protein i kanal havkat, Ictalurus punctatus, embryoner til Gene Editing

En hurtig og letkøbt Pipeline for generering af genomisk punkt mutanter i C. elegans bruger CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteins

CRISPR/Cas9 gen redigering at gøre betinget mutanter af menneskelige Malaria parasitten, P. falciparum

CRISPR/Cas9 ribonucleoprotein-medieret præcis Genredigering ved Rørelektroporation

Introduktion af et gen knockout direkte i den Amastigote fase af Trypanosoma cruzi ved hjælp af Crispr/Cas9 system

Generation af definerede genomiske modifikationer med CRISPR-CAS9 i humane pluripotente stamceller

Undersøgelse af den transkriptionelle rolle af en RUNX1 intronic LYDDÆMPER af crispr/Cas9 ribonucleoprotein i akutte myeloid leukæmiceller

Read Article