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CRISPR/Cas9-Editierung des C. elegans rbm-3.2-Gens mit dem dpy-10 Co-CRISPR Screening Marker und Assembled Ribonucleoprotein Complexes.
Journal JoVE
Génétique
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Journal JoVE Génétique
CRISPR/Cas9 Editing of the C. elegans rbm-3.2 Gene using the dpy-10 Co-CRISPR Screening Marker and Assembled Ribonucleoprotein Complexes.
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CRISPR/Cas9-Editierung des C. elegans rbm-3.2-Gens mit dem dpy-10 Co-CRISPR Screening Marker und Assembled Ribonucleoprotein Complexes.

DOI:
10.3791/62001-v

•

07:46 min

•

December 11, 2020

•

, , , ,
1Department of Chemistry and Biochemistry,The University of Tulsa

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:53C. elegans Gonad Preparation and Microinjection
  • 01:56Injected Worm Recovery and Transfer
  • 02:37PickingC. elegans for Screening
  • 03:17Single Worm Lysis and PCR
  • 04:22Restriction Digestion and Agarose Gel Electrophoresis
  • 05:08Identification of Positively Edited and Homozygous Edited Worms
  • 06:01Results: Representative C. elegans rbm-3.2 Gene Editing and Screening
  • 07:10Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Ziel dieses Protokolls ist es, eine nahtlose CRISPR/Cas9-Bearbeitung des C. elegans-Genoms unter Verwendung von zusammengesetzten Ribonukleoproteinkomplexen und dem dpy-10-Co-CRISPR-Marker für das Screening zu ermöglichen. Dieses Protokoll kann verwendet werden, um eine Vielzahl von genetischen Modifikationen in C. elegans vorzunehmen, einschließlich Insertionen, Deletionen, Genersatz und Codon-Substitutionen.

Tags

CRISPR/Cas9C. ElegansRbm-3.2 GeneDpy-10 Co-CRISPRRibonucleoprotein ComplexesGenome EditingMicroinjectionRoller PhenotypeDumpy Phenotype

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