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CRISPR/Cas9 सी Elegans आरबीएम-३.२ जीन के संपादन dpy-10 सह CRISPR स्क्रीनिंग मार्कर और इकट्ठे Ribonucleoprotein परिसरों का उपयोग कर ।
Journal JoVE
Génétique
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Journal JoVE Génétique
CRISPR/Cas9 Editing of the C. elegans rbm-3.2 Gene using the dpy-10 Co-CRISPR Screening Marker and Assembled Ribonucleoprotein Complexes.
DOI:

07:46 min

December 11, 2020

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Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:53C. elegans Gonad Preparation and Microinjection
  • 01:56Injected Worm Recovery and Transfer
  • 02:37PickingC. elegans for Screening
  • 03:17Single Worm Lysis and PCR
  • 04:22Restriction Digestion and Agarose Gel Electrophoresis
  • 05:08Identification of Positively Edited and Homozygous Edited Worms
  • 06:01Results: Representative C. elegans rbm-3.2 Gene Editing and Screening
  • 07:10Conclusion

Summary

Traduction automatique

इस प्रोटोकॉल का लक्ष्य सी एलिगेंस जीनोम के निर्बाध CRISPR/Cas9 संपादन को इकट्ठे राइबोन्यूक्लियोप्रोटीन कॉम्प्लेक्स और स्क्रीनिंग के लिए डीपीवाई-10 सह-CRISPR मार्कर का उपयोग करके सक्षम करना है । इस प्रोटोकॉल का उपयोग सी एलिगेंस में विभिन्न प्रकार के आनुवंशिक संशोधनों को करने के लिए किया जा सकता है जिसमें सम्मिलन, विलोपन, जीन प्रतिस्थापन और कोडन प्रतिस्थापन शामिल हैं।

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