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RNA polimerasi legata al DNA per la trascrizione in vitro programmabile e il calcolo molecolare
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DNA-Tethered RNA Polymerase for Programmable In vitro Transcription and Molecular Computation
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RNA polimerasi legata al DNA per la trascrizione in vitro programmabile e il calcolo molecolare

DOI:
10.3791/62073-v

•

09:26 min

•

December 29, 2021

•

, ,
1Institute of Biomedical Engineering,University of Toronto

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:32Oligonucleotide to Small Nuclear RNA-Activating Protein (SNAP) T7 RNA Polymerase (RNAP) Conjugation and Polyacrylamide Gel (PAGE) Analysis
  • 02:04Oligonucleotide-Tethered SNAP-T7 Purification
  • 04:13On-Demand Control Tethered RNAP Activity Demonstration
  • 07:08Results: Representative DNA-Tethered T7 RNAP Purification and Analysis
  • 08:44Conclusion

Summary

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Descriviamo l'ingegneria di una nuova T7 RNA polimerasi legata al DNA per regolare le reazioni di trascrizione in vitro. Discutiamo i passaggi per la sintesi e la caratterizzazione proteica, convalidiamo la regolazione trascrizionale proof-of-concept e discutiamo le sue applicazioni nel calcolo molecolare, nella diagnostica e nell'elaborazione delle informazioni molecolari.

Tags

DNA-tethered RNA PolymeraseProgrammable In Vitro TranscriptionMolecular ComputationGene Regulatory ArchitectureDNA-based CircuitsTranscriptional CircuitsSNAP T7 RNAPOligonucleotide-tethered SNAP T7 PurificationIon Exchange ColumnElution Buffer

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