Journal
/
Biochimie
/
Optimeret inkorporering af alkynylfedtsyreanaloger til påvisning af fedtaylerede proteiner ved hjælp af klikkemi
Journal JoVE
Biochimie
This content is Free Access.
Journal JoVE Biochimie
Optimized Incorporation of Alkynyl Fatty Acid Analogs for the Detection of Fatty Acylated Proteins using Click Chemistry

Optimeret inkorporering af alkynylfedtsyreanaloger til påvisning af fedtaylerede proteiner ved hjælp af klikkemi

DOI:
10.3791/62107-v

•

07:27 min

•

April 09, 2021

•

, ,
1Department of Biology,University of Waterloo

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:44Cell Culture
  • 01:25Preparation and Saponification of Fatty Acid Analogs
  • 03:35Click Reaction on Cell Lysates
  • 04:12Click Reaction on Immunoprecipitated Proteins
  • 05:13Results: Detection of Fatty Acylated Proteins Using Click Chemistry
  • 06:57Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Undersøgelsen af fedtacylation har vigtige implikationer i cellulære proteininteraktioner og sygdomme. Præsenteret her er en modificeret protokol til forbedring af klikkemidetektion af fedt acylerede proteiner, som kan anvendes i forskellige celletyper og kombineres med andre assays, herunder pulsjagt og massespektrometri.

Tags

Alkynyl Fatty Acid AnalogsClick ChemistryFatty Acylated ProteinsFatty Acid LabelingMetabolic LabelingHEK-293 T-cellsBSA-bound Fatty AcidsSaponificationPotassium HydroxideFatty Acid-free BSA

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

Identifikation af fedtsyrer i<em> Bacillus cereus</em

Hydrolyseprodukter af en Ni-Schiff-Base Complex Brug af betingelser egnet til Bevarelse af syrelabile Protecting Groups

Optimeret protokol til ekstraktion af proteiner fra humanmitralventilen

Fedtsyre 13C Isotopologue profilering giver indblik i trofiske Carbon overførsel og Lipid metabolisme af hvirvelløse forbrugere

Genetiske indarbejdelse af Biosynthesized L-dihydroxyphenylalanine (DOPA) og dens anvendelse på Protein konjugation

Opsamling og identifikation af RNA-bindende proteiner ved hjælp af klik kemi-assisteret RNA-interactome Capture (CARIC) strategi

Isolering af lipoprotein partikler fra hønseæg æggeblomme til undersøgelse af bakteriel Patogenchlorid fedtsyre inkorporering i membran Fosfolipids

Kinetisk screening af Nukleaseaktivitet ved hjælp af nukleinsyre sonder

Klikkemibaseret fluorometrisk assay for apolipoprotein N-acyltransferase fra enzymkarakterisering til screening med høj kapacitet

Tværgående 2000 af ældre ris(Oryza sativa L.) Kerner til scanning elektronmikroskopi imaging ved hjælp af pipette tips som immobilisering Support

Read Article