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Myosin-spezifische Anpassungen von In-vitro-Fluoreszenzmikroskopie-basierten Motilitätsassays
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Myosin-Specific Adaptations of In vitro Fluorescence Microscopy-Based Motility Assays
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Myosin-spezifische Anpassungen von In-vitro-Fluoreszenzmikroskopie-basierten Motilitätsassays

DOI:
10.3791/62180-v

•

08:57 min

•

February 04, 2021

•

, , , ,
1Laboratory of Molecular Physiology, Cell and Developmental Biology Center, National Heart, Lung and Blood Institute,National Institutes of Health, 2Department of Physiology, Perelman School of Medicine,University of Pennsylvania

Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 01:04Gliding Actin Filament Assay
  • 05:02Performing the Myosin 5a TIRF Microscopy Assay
  • 06:40Results: Gliding Activity Assay of the NM2b and M5a-HMM Filaments
  • 08:05Conclusion

Summary

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Hier wird ein Verfahren zur Exprimisierung und Reinigung von Myosin 5a vorgestellt, gefolgt von einer Diskussion seiner Charakterisierung, wobei sowohl Ensemble- als auch Einzelmolekül-In-vitro-Fluoreszenzmikroskopie-basierte Assays verwendet werden, und wie diese Methoden für die Charakterisierung von nichtmuskleärem Myosin 2b modifiziert werden können.

Tags

MyosinIn VitroFluorescence MicroscopyMotility AssaysNon-muscle MyosinProtein DynamicsSingle MoleculeEnsembleCytoskeletal SystemsKinesinsDyneinsMicrotubulesNitrocelluloseFlow Chamber

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