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Ensaio de imagem quantitativa in vitro para fagocitose de células de neuroblastoma morto por iPSC-Macrófagos
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Journal JoVE Neurosciences
In vitro Quantitative Imaging Assay for Phagocytosis of Dead Neuroblastoma Cells by iPSC-Macrophages

Ensaio de imagem quantitativa in vitro para fagocitose de células de neuroblastoma morto por iPSC-Macrófagos

DOI:
10.3791/62217-v

•

09:48 min

•

February 14, 2021

•

, , , ,
1James Martin Stem Cell Facility, Sir William Dunn School of Pathology,University of Oxford, 2Alzheimer’s Research UK Oxford Drug Discovery Institute, Nuffield Department of Medicine Research Building,University of Oxford, 3UK Dementia Research Institute,Cardiff University

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:41Preparation of Dead SH-SY5Ys
  • 02:03Labeling of Dead SH-SY5Ys with pH-Sensitive Red Fluorescent Dye
  • 03:18Staining of iPSC-Macrophages
  • 04:50Fixed-Cell High-Content Imaging
  • 07:28Results: Imaging, Optimization and Validation of Phagocytosis Assay
  • 09:16Conclusion

Summary

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Doenças neurodegenerativas estão associadas a funções de microglia disreguladas. Este artigo descreve um ensaio in vitro de fagocitose de células neuroblastoma por macrófagos iPSC. As leituras quantitativas de microscopia são descritas tanto para imagens de lapso de tempo de células vivas quanto para imagens de alto conteúdo de células fixas.

Tags

Keywords: In VitroQuantitative Imaging AssayPhagocytosisDead Neuroblastoma CellsIPSC-macrophagesNeurodegenerative DiseaseSH-SY5Y CellsCell DissociationFixationPH-sensitive DyeFluorescent DyeMacrophage MediaHoechst 33342

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