Journal
/
Biologie
/
Levering av Cas9/sgRNA Ribonucleoprotein Complex i udødelige og primære celler via viruslignende partikler ("Nanoblades")
Journal JoVE
Biologie
This content is Free Access.
Journal JoVE Biologie
Delivery of the Cas9/sgRNA Ribonucleoprotein Complex in Immortalized and Primary Cells via Virus-like Particles (“Nanoblades”)

Levering av Cas9/sgRNA Ribonucleoprotein Complex i udødelige og primære celler via viruslignende partikler ("Nanoblades")

DOI:
10.3791/62245-v

•

09:23 min

•

March 31, 2021

•

, , ,
1LBMC, Laboratoire de Biologie et Modélisation de la Cellule Univ Lyon, ENS de Lyon, Université Claude Bernard Lyon 1, CNRS, UMR 5239, INSERM, U1210, Lyon, 69007, France, 2CIRI, Centre International de Recherche en Infectiologie Univ Lyon, Inserm, U1111, Université Claude Bernard Lyon 1, CNRS, UMR5308, ENS de Lyon, F-69007, Lyon, France

Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 00:56Nanoblade Preparation
  • 02:45Concentration of Nanoblades on a Sucrose-Cushion
  • 04:16Monitoring Cas9 Loading Within Nanoblades and Transduction of Cells
  • 06:24Results: Characterization of Nanoblades
  • 08:29Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Vi har utviklet en enkel og billig protokoll for å laste Cas9 / single-guide RNA (sgRNA) ribonucleoprotein komplekser innen viruslignende partikler. Disse partiklene, kalt "Nanoblades", tillater effektiv levering av Cas9 / sgRNA-komplekset i udødelige og primære celler så vel som in vivo.

Tags

Keywords: Cas9SgRNARibonucleoproteinVirus-like ParticlesNanobladesGenome EditingHEK 293T CellsTransfectionUltracentrifugationSucrose Gradient

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/62245?article_type=v

Purification and Visualization of Influenza A Viral Ribonucleoprotein Complexes
check_url/fr/62245?article_type=v

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus
check_url/fr/62245?article_type=v

Primary Culture and Plasmid Electroporation of the Murine Organ of Corti.

check_url/fr/62245?article_type=v

Isolering og Primær kultur Rat Nedsatt Cells
check_url/fr/62245?article_type=v

Isolasjon og Primær Culture of Mouse endotelceller fra aorta
check_url/fr/62245?article_type=v

High Yield Expression av rekombinant humant Proteiner med Transient Transfeksjon av HEK293 Celler i Suspension
check_url/fr/62245?article_type=v

Uttrykk og rensing av viruslignende partikler for vaksinasjon
check_url/fr/62245?article_type=v

Et grafisk brukergrensesnitt for programvareassistert sporing av proteinkonsentrasjon i dynamiske cellulære protrusjoner
check_url/fr/62245?article_type=v

Metode for merking utskrifter i individuelle Escherichia coli celler for Single-molekylet fluorescens In Situ hybridisering eksperimenter
check_url/fr/62245?article_type=v

Isolering av humane primære ventilceller for in vitro sykdomsmodellering

Read Article