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高細胞密度バイオリアクターを用いたリアルタイム定量細胞内NMRによるヒト細胞におけるタンパク質-リガンド相互作用のモニタリング

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Monitoring Protein-Ligand Interactions in Human Cells by Real-Time Quantitative In-Cell NMR using a High Cell Density Bioreactor

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高細胞密度バイオリアクターを用いたリアルタイム定量細胞内NMRによるヒト細胞におけるタンパク質-リガンド相互作用のモニタリング

DOI:

10.3791/62323-v

•

10:25 min

•

March 09, 2021

•

Letizia Barbieri², Enrico Luchinat³

¹Magnetic Resonance Center − CERM,University of Florence, ²Consorzio Interuniversitario Risonanze Magnetiche di Metalloproteine − CIRMMP, ³Neurofarba Department,University of Florence

Chapitres

00:05Introduction
00:47Bioreactor Setup
01:34Preparation of the Cell Sample
04:03Bioreactor Operation and NMR Experiments
06:00MCR-ALS Analysis
08:06Results: Monitoring Protein-Ligand Interactions by Real-Time Quantitative In-Cell NMR
09:48Conclusion

Summary

Traduction automatique

このプロトコルは、カプセル化されたヒト細胞を最大72時間生存可能に保つためのNMRバイオリアクターのセットアップを説明し、その後、時間分解された細胞内NMRデータ取得および分析を行う。この方法論は、細胞内のタンパク質-リガンド相互作用をリアルタイムでモニターするために適用されます。

Tags

In-cell NMR Protein-ligand Interactions Human Cells Bioreactor Real-time Monitoring Protein Structure Protein Function Conformational Changes Chemical Changes Isotope Labeling HEK 293T Cells Agarose Threads Cell Embedding Flow Unit NMR Tube Temperature Control Cell Viability Cell Metabolism

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