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Identification des protéines de liaison des petits ligands avec l’action capillaire radiale différentielle du test de ligand (DRaCALA)
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Identifying the Binding Proteins of Small Ligands with the Differential Radial Capillary Action of Ligand Assay (DRaCALA)
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Identification des protéines de liaison des petits ligands avec l’action capillaire radiale différentielle du test de ligand (DRaCALA)

DOI:
10.3791/62331-v

•

09:26 min

•

March 19, 2021

•

, ,
1Department of Biology,University of Copenhagen

Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 00:42Preparation of Whole Cell Lysates
  • 01:43Nickel-Nitrilotriacetic Acid (Ni-NTA) Affinity Purification of Relseq and GppA
  • 02:55Gel Filtration
  • 03:33Synthesis of 32P-Labeled Guanosine Pentaphosphate (pppGpp) and Guanosine Tetraphosphate (ppGpp)
  • 05:08DRaCALA Screening of the Target Proteins of (p)ppGpp
  • 06:37Quantification and Identification of Potential Target Proteins
  • 07:46Results: DRaCALA Plate Screening and Quantification
  • 08:39Conclusion

Summary

Traduction automatique

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L’action capillaire radiale différentielle du test de ligand (DRaCALA) peut être utilisée pour identifier les petites protéines de liaison au ligand d’un organisme à l’aide d’une bibliothèque ORFeome.

Tags

Keywords: DRaCALASmall Signaling MoleculesEffector ProteinsOVium LibraryE. ColiIPTGLysis BufferNickel-NTA ResinWashing BufferElution BufferGel Filtration

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