Journal
/
Biochimie
/
Identifisere bindingsproteiner av små ligander med differensial radial kapillær virkning av Ligand Assay (DRaCALA)
Journal JoVE
Biochimie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Biochimie
Identifying the Binding Proteins of Small Ligands with the Differential Radial Capillary Action of Ligand Assay (DRaCALA)

Identifisere bindingsproteiner av små ligander med differensial radial kapillær virkning av Ligand Assay (DRaCALA)

DOI:
10.3791/62331-v

•

09:26 min

•

March 19, 2021

•

, ,
1Department of Biology,University of Copenhagen

Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 00:42Preparation of Whole Cell Lysates
  • 01:43Nickel-Nitrilotriacetic Acid (Ni-NTA) Affinity Purification of Relseq and GppA
  • 02:55Gel Filtration
  • 03:33Synthesis of 32P-Labeled Guanosine Pentaphosphate (pppGpp) and Guanosine Tetraphosphate (ppGpp)
  • 05:08DRaCALA Screening of the Target Proteins of (p)ppGpp
  • 06:37Quantification and Identification of Potential Target Proteins
  • 07:46Results: DRaCALA Plate Screening and Quantification
  • 08:39Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Differensial radial kapillærvirkning av Ligand Assay (DRaCALA) kan brukes til å identifisere små ligandbindende proteiner av en organisme ved hjelp av et ORFeome-bibliotek.

Tags

Keywords: DRaCALASmall Signaling MoleculesEffector ProteinsOVium LibraryE. ColiIPTGLysis BufferNickel-NTA ResinWashing BufferElution BufferGel Filtration

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/62331?article_type=v

Identifisering av lite molekyl bindende proteiner i en Native Cellular Miljø via Live-celle Photoaffinity Merking
check_url/fr/62331?article_type=v

Metode for å identifisere lavmolekylære inhibitorer av protein-protein samhandling mellom HCN1 og TRIP8b
check_url/fr/62331?article_type=v

Måle Biomolecular DSC profiler med Thermolabile ligander å raskt karakterisere Folding og bindende interaksjoner
check_url/fr/62331?article_type=v

Nitrogen kavitasjon og differensial sentrifugering tillater overvåking fordelingen av ytre membran proteiner i kulturperler celler
check_url/fr/62331?article_type=v

Rab10 fosforylering gjenkjenning av LRRK2 aktivitet SDS-side med en fosfat-bindende kode
check_url/fr/62331?article_type=v

Fange samhandling Kinetics en Ion kanal protein med små molekyler av Bio-lags Interferometry analysen
check_url/fr/62331?article_type=v

Metode for effektiv Refolding og rensing av Chemoreceptor Ligand bindende domene
check_url/fr/62331?article_type=v

Påvisning av små GTPase Prenylation og GTP bindende ved hjelp av membran fraksjoneres og GTPase-koblede Immunosorbent analysen
check_url/fr/62331?article_type=v

Analyse av AtHIRD11 iboende forstyrrelse og bindende mot metall ioner av kapillær Gel gelelektroforese og affinitet kapillært geleelektroforese
check_url/fr/62331?article_type=v

A semi-High-gjennomstrømning tilpasning av NADH-koblet ATPase analysen for screening små molekyl hemmere

Read Article