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イン・ヴィトロ E3ユビキチンリガーゼ関数の解析

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Biologie

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In Vitro Analysis of E3 Ubiquitin Ligase Function

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イン・ヴィトロ E3ユビキチンリガーゼ関数の解析

DOI:

10.3791/62393-v

•

06:06 min

•

May 14, 2021

•

Leonie Müller, Carl Elias Kutzner², Vishnu Balaji, Thorsten Hoppe²

¹Institute for Genetics and Cologne Excellence Cluster on Cellular Stress Responses in Aging Associated Diseases (CECAD),University of Cologne, ²Center for Molecular Medicine Cologne,University of Cologne

Chapitres

00:05Introduction
00:43In Vitro Auto-Ubiquitylation Assay
01:31In vitro Substrate Ubiquitylation Assay
02:13Lysine Discharge Assay
03:37Results: Analysis of the Ubiquitylation Products
05:28Conclusion

Summary

Traduction automatique

本研究は、E3ユビキチンリガーゼ触媒活性の分析のための詳細な インビトロ ユビキトリメンテーションアッセイプロトコルを提供する。組換えタンパク質は 、大腸菌 培養などの原核生物系を用いて発現した。

Tags

Keywords: E3 Ubiquitin Ligase In Vitro Analysis E2 Enzyme Specificity Substrate Selection Ubiquitin Transfer Auto-ubiquitylation Assay Substrate Ubiquitylation Assay Lysine Discharge Assay Recombinant Expression Eukaryotic Proteins SDS-PAGE Thermal Cycler Master Mix EDTA Apyrase

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