Journal
/
Biochimie
/
Harpiksassisteret indfangning kombineret med isobarisk tandemmassemærkemærkning til multiplekset kvantificering af protein thioloxidation
Journal JoVE
Biochimie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Biochimie
Resin-Assisted Capture Coupled with Isobaric Tandem Mass Tag Labeling for Multiplexed Quantification of Protein Thiol Oxidation

Harpiksassisteret indfangning kombineret med isobarisk tandemmassemærkemærkning til multiplekset kvantificering af protein thioloxidation

DOI:
10.3791/62671-v

•

07:16 min

•

June 21, 2021

•

, , ,
1Integrative Omics, Biological Sciences Division,Pacific Northwest National Laboratory, 2Bioproducts Sciences and Engineering Laboratory, Department of Biological Systems Engineering,Washington State University

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:31Resin-Assisted Capture
  • 03:52On-Resin Tryptic Digestion and Tandem Mass Tag (TMT) Labeling
  • 04:45Peptide Elution
  • 05:47Results: Analysis of Peptides from Resin-Assisted Capture Enrichment
  • 06:35Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Protein thiol oxidation har betydelige konsekvenser under normale fysiologiske og patofysiologiske forhold. Vi beskriver detaljerne i en kvantitativ redoxproteomics-metode, der anvender harpiksassisteret indfangning, isobarisk mærkning og massespektrometri, hvilket muliggør stedsspecifik identifikation og kvantificering af reversibelt oxiderede cysteinrester af proteiner.

Tags

Protein Thiol OxidationResin-assisted CaptureIsobaric Tandem Mass Tag LabelingQuantificationCystine ResiduesSample PreparationAcetone WashProtein SolubilizationBCA AssayCentrifugal FiltrationProtein ReductionDTTBuffer Exchange

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

Protein Complex Affinity Capture fra Cryomilled pattedyrsceller

Forbedret Prøve Multiplexing af væv under anvendelse kombinerede Precursor isotopmærkning og isobar Tagging (cPILOT)

Løsning affinitetsrensede proteinkomplekser ved Blå Native PAGE og protein Korrelation Profilering

En Tandem væskekromatografi-massespektrometri-baseret tilgang til Metabolit Analyse af<em> Staphylococcus aureus</em

Dyb proteomet profilering af Isobar mærkning, omfattende væskekromatografi, massespektrometri og Software-assisteret kvantificering

Voksende Protein krystaller med forskellige dimensioner ved hjælp af automatiseret krystallisering kombineret med In Situ dynamisk lysspredning

Proteom-wide kvantificering af mærkning homogenitet på enkelt-molekyle niveau

Kvantificering af protein interaktions netværk dynamik ved hjælp af Multiplexed Co-Immunopræcipitation

Kvantitativ analyse af cellulære lipidom af Saccharomyces Cerevisiae Ved hjælp af flydende kromatografi kombineret med tandem massespektrometri

Påvisning af Protein S-Acylation ved hjælp af Acyl-Resin Assisted Capture

Read Article