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Captura assistida por resina juntamente com marcação de massa em tandem isobárica para quantificação multiplexada da oxidação de proteína tiol
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Resin-Assisted Capture Coupled with Isobaric Tandem Mass Tag Labeling for Multiplexed Quantification of Protein Thiol Oxidation

Captura assistida por resina juntamente com marcação de massa em tandem isobárica para quantificação multiplexada da oxidação de proteína tiol

DOI:
10.3791/62671-v

•

07:16 min

•

June 21, 2021

•

, , ,
1Integrative Omics, Biological Sciences Division,Pacific Northwest National Laboratory, 2Bioproducts Sciences and Engineering Laboratory, Department of Biological Systems Engineering,Washington State University

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:31Resin-Assisted Capture
  • 03:52On-Resin Tryptic Digestion and Tandem Mass Tag (TMT) Labeling
  • 04:45Peptide Elution
  • 05:47Results: Analysis of Peptides from Resin-Assisted Capture Enrichment
  • 06:35Conclusion

Summary

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A oxidação do tiol proteico tem implicações significativas em condições fisiológicas e fisiopatológicas normais. Descrevemos os detalhes de um método proteômico redox quantitativo, que utiliza captura assistida por resina, marcação isobárica e espectrometria de massa, permitindo a identificação e quantificação específicas do local de resíduos de cisteína oxidada reversivelmente de proteínas.

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Keywords: Protein Thiol OxidationResin-assisted CaptureIsobaric Tandem Mass Tag LabelingQuantificationCystine ResiduesSample PreparationAcetone WashProtein SolubilizationBCA AssayCentrifugal FiltrationProtein ReductionDTTBuffer Exchange

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