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Medindo o pH, As Químicas Redox e a Capacidade Degradativa dos Macropinossos usando microscopia multiscopia memétrica de proporção de fluorofora dupla
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Journal JoVE Immunologie et infection
Measuring the pH, Redox Chemistries, and Degradative Capacity of Macropinosomes using Dual-Fluorophore Ratiometric Microscopy

Medindo o pH, As Químicas Redox e a Capacidade Degradativa dos Macropinossos usando microscopia multiscopia memétrica de proporção de fluorofora dupla

DOI:
10.3791/62733-v

•

07:31 min

•

August 19, 2021

•

,
1Department of Biochemistry & Microbiology, Faculty of Science,University of Victoria, 2Department of Comparative Biology and Experimental Medicine, Faculty of Veterinary Science,University of Calgary, 3Calvin, Joan and Phoebe Snyder Institute for Chronic Diseases,University of Calgary

Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 00:28Measuring Macropinosome pH
  • 02:06In Situ Calibration of Macropinosome pH
  • 03:04Measuring Oxidative Events within Macropinosomes
  • 04:22Measuring Protein Digestion within Macropinosomes
  • 05:30Results: Measuring the pH, Oxidative Events, and Protein Degradation in Macropinosomes using Dual-Fluorophore Ratiometric Microscopy
  • 06:59Conclusion

Summary

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Descrevemos protocolos para medir pH, eventos oxidativos e digestão de proteínas em macropinosos individuais em células vivas. Uma ênfase é colocada na microscopia metométrica de dupla fluorofora e nas vantagens que oferece sobre técnicas de base populacional.

Tags

MacropinosomesPHRedoxDegradationDual-fluorophoreRatiometric MicroscopyFluoresceinTMRHBSSPotassium Rich SolutionNigericinRAW264.7 Cells

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