/

/

Imaging Replicative Domains in Ultrastructurally Preserved Chromatin door Electron Tomography

Journal JoVE
Biologie
Author Produced

Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.

Journal JoVE Biologie

Imaging Replicative Domains in Ultrastructurally Preserved Chromatin by Electron Tomography

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Imaging Replicative Domains in Ultrastructurally Preserved Chromatin door Electron Tomography

DOI:

10.3791/62803-v

•

14:56 min

•

May 20, 2022

•

Sophie Sosnovskaya*^1,2, Amir N. Zakirov*^1,2, Ekaterina D. Ryumina*^1,3, Ekaterina Kharybina², Sergei A. Golyshev, Olga S. Strelkova, Oxana A. Zhironkina, Andrei Moiseenko, Anton Orekhov, Igor I. Kireev^2,5

¹Belozersky Institute of Physico-chemical Biology,Lomonosov Moscow State University, ²Faculty of Biology,Lomonosov Moscow State University, ³Faculty of Bioengineering and Bioinformatics,Lomonosov Moscow State University, ⁴National Research Center, Kurchatov Institute, ⁵V.I. Kulakov National Medical Research Center for Obstetrics, Gynecology, and Perinatology

Chapitres

00:08Introduction
00:35Cells Labeling and Fixation
02:13Click-Reaction
05:09Ag-Amplification
06:28Gold Toning
06:42ChromEM
07:23Dehydration and Epon Embedding
12:50Electron Tomography
13:06Representative Results
14:14Conclusions

Summary

Traduction automatique

Dit protocol presenteert een techniek voor het in kaart brengen van replicatielocaties met hoge resolutie in structureel geconserveerd chromatine in situ die een combinatie van pre-embedding EdU-streptavidin-Nanogold-labeling en ChromEMT gebruikt.

Tags

Keywords: Electron Tomography Replicative Domains Chromatin EdU Labeling Silver Enhancement ChromEM Staining Glutaraldehyde Fixation Plasma Membrane Permeabilization Biotin-azide Conjugation Streptavidin-Nanogold

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

Chromatine Isolatie door RNA-zuivering (Chirp)

Visualisatie van ATP synthase Dimeren in Mitochondriën door Electron Cryo-tomografie

In Vivo 4-dimensionale Tracking van hematopoietische stamcellen en progenitorcellen in volwassen muis calvarial Bone Marrow

Isolatie van specifieke genomische regio en identificatie van geassocieerde moleculen door enChIP

Voorbereiding en observatie van Thick biologische monsters door Scanning Transmission Electron Tomografie

Bereiding van de monsters en de beeldvorming van de Exosomes door transmissie-elektronenmicroscopie

3D mitochondriale ultrastructuur van Drosophila indirecte vlucht spier geopenbaard door seriële-sectie Elektronentomografie

Visualisatie van DNA verdichting in cyanobacteriën door hoogspannings-Cryo-Elektronentomografie

Bereiding van de biologische monsters door hogedruk bevriezing, magnetron-bijgewoonde contrastverbetering, en minimale hars inbedding voor Volume Imaging

De CryoAPEX-methode voor elektronenmicroscopieanalyse van membraaneiwitlokalisatie binnen ultrastructureel bewaarde cellen

Read Article