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Método DE GOTÍcula Digital PCR para quantificação da eficiência de transdução AAV em Murine Retina
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Journal JoVE Neurosciences
Digital Droplet PCR Method for the Quantification of AAV Transduction Efficiency in Murine Retina

Método DE GOTÍcula Digital PCR para quantificação da eficiência de transdução AAV em Murine Retina

DOI:
10.3791/63038-v

•

09:50 min

•

December 25, 2021

•

, , , ,
1Molecular Biology, Genetics and Bioengineering Program,Sabanci University, 2Nanotechnology Research and Application Center (SUNUM),Sabanci University

Chapitres

  • 00:01Introduction
  • 00:57Small Scale AAV Production
  • 02:52Intravitreal Injection of AAV
  • 04:17Fluorescence and Fundus Imaging
  • 04:48Retina Isolation
  • 05:16Tissue Genomic DNA Isolation
  • 05:57Digital Droplet PCR Analysis of Mouse Retina Samples for Quantification of Viral Genomes
  • 07:52Résultats
  • 09:07Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Este protocolo apresenta como quantificar a eficiência de transdução AAV na retina do mouse usando PCR de gotícula digital (dd-PCR) juntamente com produção de AAV de pequena escala, injeção intravitreal, imagem da retina e isolamento do DNA genômico da retina.

Tags

Digital Droplet PCRAAV TransductionMurine RetinaQuantificationAbsolute QuantificationCRISPRGene TherapyMitochondrial DNATransfectionVirus Purification

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