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Immunologie et infection
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Journal JoVE Immunologie et infection
Visualization of Inflammatory Caspases Induced Proximity in Human Monocyte-Derived Macrophages
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Visualización de la proximidad inducida por caspasas inflamatorias en macrófagos derivados de monocitos humanos

DOI:
10.3791/63162-v

•

08:41 min

•

April 06, 2022

•

,
1Department of Pediatrics, Division of Hematology-Oncology, Department of Molecular and Cellular Biology, Texas Children’s Hospital William T. Shearer Center for Human Immunobiology,Baylor College of Medicine

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:51Preparation of Cells for Electroporation
  • 02:11Nucleofection of Caspase BiFC Components into Human Monocyte-Derived Macrophages
  • 04:41Treatment of Transfected MDM and Caspase BiFC Data Acquisition
  • 06:37Results: Differentiation of CD14-Monocytes and Transfection of Human Monocyte-Derived Macrophages
  • 08:12Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Este protocolo describe el flujo de trabajo para obtener macrófagos derivados de monocitos (MDM) a partir de muestras de sangre humana, un método simple para introducir eficientemente reporteros de complementación de fluorescencia bimolecular de caspasa inflamatoria (BiFC) en MDM humanos sin comprometer la viabilidad y el comportamiento celular, y un enfoque basado en imágenes para medir la activación de la caspasa inflamatoria en células vivas.

Tags

Keywords: Inflammatory CaspasesProximityHuman Monocyte-derived MacrophagesVisualizationMolecular-levelPrimary Immune CellsOligomerizationMicroscopic MethodologiesTrypsin-EDTAPBSCell NumberHemocytometerReporter PlasmidCaspase BiFC PlasmidsNucleofectionElectroporation

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