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Controle óptico de alto rendimento e registro do sinal de cálcio em cardiomiócitos derivados de iPSC para testes de toxicidade e triagem fenotípica de drogas
Journal JoVE
Médecine
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Journal JoVE Médecine
High-Throughput Optical Controlling and Recording Calcium Signal in iPSC-Derived Cardiomyocytes for Toxicity Testing and Phenotypic Drug Screening
DOI:

10:01 min

March 31, 2022

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Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:57iPSC Derived Cardiomyocytes Preparation
  • 02:28Expression of Genetically Encoded Calcium Indicators
  • 03:24Image Acquisition and Functional Assays for Toxicity Test and Phenotypic Screening
  • 05:22Small Molecule Preparation
  • 05:58Imaging Processing and Analysis
  • 06:31Results: Imaging and Processing of Cells
  • 09:28Conclusion

Summary

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O presente protocolo descreve o controle totalmente óptico e a observação da atividade celular desencadeada em cardiomiócitos derivados de iPSC (iPSC-CMs) para triagem de drogas de alto rendimento e testes de toxicidade. A quantificação multiparamétrica de padrões fenotípicos no tempo e no espaço é mostrada. Efeitos a longo prazo de drogas ao longo de horas, ou medições sequenciais ao longo dos dias, são demonstrados.

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