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Gepooltes shRNA-Bibliotheksscreening zur Identifizierung von Faktoren, die einen Phänotyp der Arzneimittelresistenz modulieren
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Chapitres
- 00:00Introduction
- 00:24Selection of the Most Potent Promoter to Obtain Persistent and Prolonged Expression of the shRNAs
- 02:01Preparation of Pooled Lentiviral Human Epigenetic Factor shRNA Library
- 04:48Estimation of the Transduction Efficiency of Lentiviruses
- 06:03Transduction of Pooled Epigenetic shRNA Library in the Drug-Resistant Cell Line
- 07:20Enrichment of GFP Positive Cells
- 07:54Dropout Screening to Identify Epigenetic Factors Mediating Drug Resistance
- 09:20Amplification of the Integrated shRNAs by PCR
- 11:08Next-Generation Sequencing and Data Analysis
- 11:57Representative Results
- 14:30Conclusion
Das RNAi-Screening (High-Throughput-RNA-Interferenz) unter Verwendung eines Pools lentiviraler shRNAs kann ein Werkzeug sein, um therapeutisch relevante synthetische tödliche Ziele in Malignomen nachzuweisen. Wir bieten einen gepoolten shRNA-Screening-Ansatz zur Untersuchung der epigenetischen Effektoren bei akuter myeloischer Leukämie (AML).
