/
/
Poolad shRNA-biblioteksscreening för att identifiera faktorer som modulerar en läkemedelsresistensfenotyp
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:00Introduction
- 00:24Selection of the Most Potent Promoter to Obtain Persistent and Prolonged Expression of the shRNAs
- 02:01Preparation of Pooled Lentiviral Human Epigenetic Factor shRNA Library
- 04:48Estimation of the Transduction Efficiency of Lentiviruses
- 06:03Transduction of Pooled Epigenetic shRNA Library in the Drug-Resistant Cell Line
- 07:20Enrichment of GFP Positive Cells
- 07:54Dropout Screening to Identify Epigenetic Factors Mediating Drug Resistance
- 09:20Amplification of the Integrated shRNAs by PCR
- 11:08Next-Generation Sequencing and Data Analysis
- 11:57Representative Results
- 14:30Conclusion
RNA-interferens (RNAi) screening med hög genomströmning med hjälp av en pool av lentivirala shRNA kan vara ett verktyg för att detektera terapeutiskt relevanta syntetiska dödliga mål vid maligniteter. Vi tillhandahåller en poolad shRNA-screeningmetod för att undersöka de epigenetiska effektorerna vid akut myeloisk leukemi (AML).
