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Seguimiento de partículas sensibles a la masa para caracterizar la dinámica de macromoléculas asociada a la membrana
Journal JoVE
Biochimie
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Journal JoVE Biochimie
Mass-Sensitive Particle Tracking to Characterize Membrane-Associated Macromolecule Dynamics
DOI:

13:30 min

February 18, 2022

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Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 00:43Cleaning of Microscope Slides
  • 01:48Assembly of Flow Chambers
  • 02:41Supported Lipid Bilayer (SLB) Formation
  • 03:31Imaging
  • 04:31Data Analysis
  • 10:25Results: Native and Ratiometric View of Exemplary Surfaces
  • 11:01Results: Calibration of the Mass-to-Contrast Relation for MSPT Measurements
  • 12:15Results: Deciphering Oligomer States of Membrane-Associated Proteins
  • 12:57Conclusion

Summary

Traduction automatique

Este protocolo describe un enfoque de procesamiento de imágenes basado en iSCAT y seguimiento de una sola partícula que permite la investigación simultánea de la masa molecular y el comportamiento difusivo de las macromoléculas que interactúan con las membranas lipídicas. Las instrucciones paso a paso para la preparación de muestras, la conversión de masa a contraste, la adquisición de películas y el posprocesamiento se proporcionan junto con instrucciones para prevenir posibles trampas.

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