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ニトロレダクターゼ/メトロニダゾール媒介アブレーションとゼブラフィッシュ網膜色素上皮の再生を研究するためのMATLABプラットフォーム(RpEGEN)
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Nitroreductase/Metronidazole-Mediated Ablation and a MATLAB Platform (RpEGEN) for Studying Regeneration of the Zebrafish Retinal Pigment Epithelium
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ニトロレダクターゼ/メトロニダゾール媒介アブレーションとゼブラフィッシュ網膜色素上皮の再生を研究するためのMATLABプラットフォーム(RpEGEN)

DOI:
10.3791/63658-v

•

13:12 min

•

March 02, 2022

•

, ,
1Department of Ophthalmology, Louis J. Fox Center for Vision Restoration,University of Pittsburgh School of Medicine, 2Earth Research Institute,University of California, Santa Barbara, 3Department of Developmental Biology,University of Pittsburgh School of Medicine

Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 01:00Screening Zebrafish Larvae for rpe65a:nfsB-eGFP and Genetic Ablation of the Retinal Pigment Epithelium
  • 03:02Incorporating Pharmacological Treatment into Zebrafish Retinal Pigment Epithelium Ablation Protocol
  • 06:35Confocal Microscope Z-stack Image Preprocessing in FIJI (ImageJ)
  • 08:19Quantification and Visualization of RPE Regeneration Using RpEGEN Scripts
  • 10:42Results: RPE Expression, Ablation, Regeneration Quantification
  • 12:39Conclusion

Summary

Traduction automatique

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このプロトコルは、トランスジェニックゼブラフィッシュモデルを用いて網膜色素上皮(RPE)を遺伝的にアブレーションする方法論を記載している。薬理学的化合物を用いたシグナル伝達経路調節を組み込むようにプロトコルを適応させることは、広範囲に詳述されている。色素沈着に基づいてRPE再生を定量化するためのMATLABプラットフォームが開発され、提示され、議論される。

Tags

ZebrafishRetinal Pigment EpitheliumRPERegenerationNitroreductaseMetronidazoleMATLABRpEGENAblationTransgenicEGFPPTUPharmacological Treatment

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