Journal
/
Biochimie
/
Оптимизированный одномолекулярный анализ для количественной оценки фосфорилирования белка
Journal JoVE
Biochimie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Biochimie
An Optimized Single-Molecule Pull-Down Assay for Quantification of Protein Phosphorylation
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Оптимизированный одномолекулярный анализ для количественной оценки фосфорилирования белка

DOI:
10.3791/63665-v

•

07:45 min

•

June 06, 2022

•

, , , , , , ,
1Department of Pathology,University of New Mexico School of Medicine, 2Department of Physics and Astronomy,University of New Mexico, 3Comprehensive Cancer Center,University of New Mexico Health Sciences Center

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:53Coverslip Preparation
  • 03:18Functionalization of Array with Biotinylated Antibody
  • 04:09SiMPull of Proteins of Interest from Whole-Cell Lysates
  • 04:40Image Acquisition
  • 05:45Results: Capture of EGFR-GFP from Protein Lysates Using SiMPull
  • 07:19Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Настоящий протокол описывает пробоподготовку и анализ данных для количественной оценки фосфорилирования белка с использованием улучшенного анализа вытягивания одной молекулы (SiMPull).

Tags

AI-powered Protein Phosphorylation QuantificationSingle-molecule Pull-down AssaySiMPull ProtocolAntibody LabelingAutofluorescence ReductionSingle-molecule AnalysisPhosphorylation Status Of Individual ProteinsAlternative To Western Blotting And Mass Spectrometry

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

Оптимизированный протокол для электрофоретической подвижности Сдвиг Пробирной с помощью ИК-флуоресцентным красителем-меченных

Определение конкуренции на олигопептидах для определения местонахождения фосфорилирования

Assay для фосфорилирования и привязки микротрубочек наряду с локализацией тау белка в клетках рака прямой кишки

Одноместный молекула манипуляции G-quadruplexes, Магнитные пинцеты

С использованием трехцветной сингл молекула лад для изучения корреляции взаимодействий протеина

Ковалентной иммобилизации белков для одной молекулы силой спектроскопии

Количественная оценка протеома общесистемной маркировки однородность на уровне одной молекулы

OaAEP1-опосредованный ферментативный синтез и иммобилизация полимеризованного белка для одномолекулярной силовой спектроскопии

Электрохимилуминесценция на основе анализ для MeCP2 Белковые варианты

In Vitro одномекулярной визуализации анализ для анализа Cap-зависимых Перевод Кинетики

Read Article