Journal
/
/
反向遗传学设计正义RNA病毒变异株
Journal JoVE
Génétique
Author Produced
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Génétique
Reverse Genetics to Engineer Positive-Sense RNA Virus Variants
DOI:

15:49 min

June 09, 2022

, , ,

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:01Genome‐Wide Substitution Mutagenesis of JFH1 Using Error‐Prone PCR
  • 02:46Estimation of the Proportion of Mutations in ep‐PCR Products (Mutant Libraries)
  • 06:08Viral RNA Transfection of the Huh7.5 Cell Line
  • 07:57Quantification of Virus Titers
  • 11:59Drug‐Resistant Viral Variant Selection
  • 13:33Results: Integration of ep‐PCR and Virus Reverse Genetics to Generate HCV Mutants
  • 15:17Conclusion

Summary

Traduction automatique

该协议描述了一种通过使用易出错的PCR和反向遗传学结合全长突变RNA合成在丙型肝炎病毒基因组中引入可控遗传多样性的方法。该方法为表型选择提供了一个模型,可用于10 kb长的正义RNA病毒基因组。

Vidéos Connexes

Read Article