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Un modelo competente de hepatocitos que examina la entrada del virus de la hepatitis B a través del polipéptido cotransportador de taurocolato de sodio como objetivo terapéutico
Journal JoVE
Biochimie
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Journal JoVE Biochimie
A Competent Hepatocyte Model Examining Hepatitis B Virus Entry through Sodium Taurocholate Cotransporting Polypeptide as a Therapeutic Target
DOI:

11:34 min

May 10, 2022

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Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 00:50Measuring the Sodium Taurocholate Co-Transporting Polypeptide (NTCP) Using Flow Cytometry
  • 04:30Anti-HBV (Hepatitis B Virus) Entry Assay
  • 06:13HBV (Hepatitis B Virus) -Cell Binding Assay
  • 06:50Taurocholic Acid Uptake Assay
  • 07:34Determination of Protein-Ligand Interactions Using Isothermal Titration Calorimetry
  • 09:14Results: Screening of Anti-Hepatitis B Virus Using Isothermal Titration Calorimetry
  • 10:36Conclusion

Summary

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Presentamos un protocolo para detectar compuestos contra el virus de la hepatitis B (VHB) dirigidos a las etapas del ciclo de vida de entrada pre y post-viral, utilizando calorimetría de titulación isotérmica para medir la afinidad de unión (KD) con el polipéptido cotransportador de taurocolato de sodio del huésped. La eficacia antiviral se determinó a través de la supresión de los marcadores del ciclo de vida viral (formación de ADNcc, transcripción y ensamblaje viral).

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