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Sf9纯化超加工驱动蛋白-3系列电机的单分子分析

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Biochimie
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Single-Molecule Analysis of Sf9 Purified Superprocessive Kinesin-3 Family Motors

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Sf9纯化超加工驱动蛋白-3系列电机的单分子分析

DOI:

10.3791/63837-v

•

08:16 min

•

July 27, 2022

•

Pushpanjali Soppina², Dipeshwari J. Shewale, Pradeep K. Naik, Virupakshi Soppina

¹Discipline of Biological Engineering,Indian Institute of Technology Gandhinagar, ²Department of Biotechnology and Bioinformatics,Sambalpur University

Chapitres

00:05Introduction
01:22P0 Virus Stock Generation
02:38P1 Virus Stock Generation and Large-Scale Infection
03:28Sf9 Purification of Kinesin-3 Motors
04:25Microtubule Polymerization and In Vitro Single-Molecule Motility Assay
05:22In Vitro Microtubule Gliding Assay
06:23Results: Analysis of Sf9-Purified Kinesin-3 Motor
07:24Conclusion

Summary

Traduction automatique

本研究详细介绍了使用Sf9杆状病毒表达系统纯化驱动蛋白-3家族成员KIF1A（1-393LZ）。这些纯化的马达的体外单分子和多马达滑动分析表现出与哺乳动物细胞裂解物的马达相当的稳健运动特性。因此，Sf9杆状病毒系统适合表达和纯化感兴趣的运动蛋白。

Tags

Keywords: Sf9 Cells Baculovirus Expression Single-molecule Analysis Kinesin-3 Motors Superprocessive Motors Single-molecule Motility Multi-motor Gliding Assays Cytoskeletal Proteins Dionine Myosin Protein Purification Affinity Purification

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