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Chapitres
- 00:05Introduction
- 01:22P0 Virus Stock Generation
- 02:38P1 Virus Stock Generation and Large-Scale Infection
- 03:28Sf9 Purification of Kinesin-3 Motors
- 04:25Microtubule Polymerization and In Vitro Single-Molecule Motility Assay
- 05:22In Vitro Microtubule Gliding Assay
- 06:23Results: Analysis of Sf9-Purified Kinesin-3 Motor
- 07:24Conclusion
Cette étude détaille la purification de KIF1A (1-393LZ), un membre de la famille des kinésines-3, à l’aide du système d’expression du baculovirus Sf9. L’analyse in vitro de glissement monomoléculaire et multimoteur de ces moteurs purifiés a montré des propriétés de motilité robustes comparables à celles des moteurs du lysat de cellules de mammifères. Ainsi, le système Sf9-baculovirus est susceptible d’exprimer et de purifier la protéine motrice d’intérêt.
