Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:05Introduction
- 01:22P0 Virus Stock Generation
- 02:38P1 Virus Stock Generation and Large-Scale Infection
- 03:28Sf9 Purification of Kinesin-3 Motors
- 04:25Microtubule Polymerization and In Vitro Single-Molecule Motility Assay
- 05:22In Vitro Microtubule Gliding Assay
- 06:23Results: Analysis of Sf9-Purified Kinesin-3 Motor
- 07:24Conclusion
Denne studien beskriver rensing av KIF1A (1-393LZ), et medlem av kinesin-3-familien, ved bruk av Sf9-baculovirusuttrykkssystem. In vitro enkeltmolekyl- og flermotorsglideanalyse av disse rensede motorene viste robuste motilitetsegenskaper som kan sammenlignes med motorer fra pattedyrcellelysat. Dermed er Sf9-baculovirus-systemet egnet til å uttrykke og rense motorprotein av interesse.
