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Análisis de una sola molécula de motores de la familia Kinesin-3 superprocesiva purificada Sf9
Journal JoVE
Biochimie
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Journal JoVE Biochimie
Single-Molecule Analysis of Sf9 Purified Superprocessive Kinesin-3 Family Motors
DOI:

08:16 min

July 27, 2022

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Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 01:22P0 Virus Stock Generation
  • 02:38P1 Virus Stock Generation and Large-Scale Infection
  • 03:28Sf9 Purification of Kinesin-3 Motors
  • 04:25Microtubule Polymerization and In Vitro Single-Molecule Motility Assay
  • 05:22In Vitro Microtubule Gliding Assay
  • 06:23Results: Analysis of Sf9-Purified Kinesin-3 Motor
  • 07:24Conclusion

Summary

Traduction automatique

Este estudio detalla la purificación de KIF1A (1-393LZ), un miembro de la familia de la quinesina-3, utilizando el sistema de expresión de baculovirus Sf9. El análisis de deslizamiento in vitro de una sola molécula y multimotor de estos motores purificados mostró propiedades de motilidad robustas comparables a los motores de lisado de células de mamíferos. Por lo tanto, el sistema Sf9-baculovirus es susceptible de expresar y purificar la proteína motora de interés.

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